小鼠細(xì)胞系來源于ATCC原代細(xì)胞，ATCC傳代細(xì)胞，sciencell細(xì)胞
原代凍存或復(fù)蘇培養(yǎng)，復(fù)蘇時(shí)間1-2周，保證細(xì)胞純度在98%以上，同時(shí)也需經(jīng)過微生物檢測(cè)，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌.
細(xì)胞名稱：小鼠細(xì)胞系
簡(jiǎn)稱:OP9
培養(yǎng)條件：MEMα（不含核苷和脫氧heg）+20%FBS
形態(tài)：貼壁；成纖維細(xì)胞樣
背景：OP9細(xì)胞株源自新生的op/op小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個(gè)突變，它不能生成有功能的巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對(duì)胚胎干細(xì)胞(ES)分化成血細(xì)胞而不是其他巨噬細(xì)胞有抑制功能。OP9細(xì)胞可以用于與小鼠胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細(xì)胞譜系的血細(xì)胞。與OP9共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu)。這個(gè)系統(tǒng)對(duì)研究造血細(xì)胞的發(fā)育和分化的分子機(jī)理有用。
細(xì)胞數(shù):1×106cells
規(guī)格:1ml/T25
運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸
細(xì)胞用途：僅供科研使用
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考
準(zhǔn)備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。
小鼠細(xì)胞系細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。
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